合成多肽有怎样的固相合成呢

2022-01-04 17:21

  合成多肽固相合成!


  多肽的合成是氨基酸重复添加的过程,通常从C端到N端(氨基端)。多肽固相合成的原理是通过共价键将目的肽的氨基酸C端与固相载体连接,然后以氨基酸N端为合成起点,脱去氨基保护基,与过量活化的两种氨基酸反应,连接长肽链,重复操作,达到理想的合成肽链长度,将肽链从树脂肽链,分离纯化,获得目标肽。


  1.Boc多肽合成法。


  Boc方法是一种经典的多肽固合成方法,以Boc为氨基酸α-氨基保护基,苯醇为侧链保护基。三氟乙酸(TFA)通常用于去除Boc。多肽合成时,Boc保护的N-α-氨基酸共价交联到树脂上,TFA切除Boc保护基,N端用弱碱中和。


合成多肽有怎样的固相合成呢


  肽链的延伸是通过二环己基碳二亚胺(DCC)激活的。偶联用强酸氢氟酸(HF)法或三氟甲磺酸(TFMSA)将合成的目标肽从树脂中解离出来。在Boc多肽合成法中,为了方便下一步多肽合成,反复使用酸进行脱离保护,实验中带入了一些副作用,如多肽容易从树脂中去除,氨基酸侧链酸性条件不稳定。


  2.Fmoc多肽合成法。


  基于Boc多肽合成法,Carpino和Han开发了一种新的多肽合成方法—Fmoc多肽合成法。


  Fmoc多肽合成法以Fmoc为氨基酸α-氨基的保护基。其优点是在酸性条件下稳定,不受TFA等试剂的影响,采用温和的碱处理可脱保护,因此侧链可采用易酸脱保护基。


  肽段的切除可以通过TFA/二氯甲烷(DCM)从树脂上定量完成,避免强酸。同时,与Boc法相比,Fmoc法反应条件温和,副反应少,产率高,Fmoc基团本身具有特征性紫外吸收,易于监测和控制反应。Fmoc法广泛应用于多肽固相合成领域。